.::. Trung tâm dữ liệu Y Sinh học :-: BioMedical Data Center .::.

[YSinhHoc.vn] - Tối ưu hóa PCR

Bạn đã thiết kế cặp mồi PCR để khuếch đại trình tự quan tâm và bạn sẵn sàng cho việc đó. Nhưng trừ phi bạn có sự bổ sung không ngừng của khuôn mẫu, enzyme polymerase và máy chu trình nhiệt với chức năng gradient – mà không kể đến thời lượng thời gian hay lòng kiên nhẫn – bạn chắc chắn không muốn dành tuần kế tiếp để tìm ra các điều kiện hoàn hảo cho phản ứng PCR của bạn. Ở đây là một số mẹo để giúp bạn thực hiện nhanh hơn (mặc dù chức năng gradient khá là tiện dụng)

Kỹ thuật MassTag PCR

Cùng với sự phát triển chóng mặt của khoa học kỹ thuật, các phương thức mới để thực hiện PCR liên tục được đưa ra nhằm cải thiện hiệu suất, hiệu quả cũng như tính đặc hiệu so với PCR truyền thống.

Như chúng ta đã biết, mục đích chính của PCR là khuếch đại một chuỗi nucleic acid dựa trên trình tự mồi đặc hiệu (sequence-specific primers). Vì nhu cầu sử dụng cũng như tính ứng dụng thiết yếu của kỹ thuật này mà càng nhiều dạng biến thể của PCR được tạo ra, ví dụ, qPCR, RACE-PCR, Digital PCR, Multiplex PCR, MassTag PCR.

Trong phần này, chúng ta sẽ cùng nhau tìm hiểu về MassTag PCR và làm thế nào để sử dụng nó trong thực nghiệm.

Tối ưu hóa cho PCR nhanh hơn

Sử dụng hạt nano tìm tế bào ung thư

Các nhà khoa học Mỹ đã phát triển một kỹ thuật dùng những hạt vàng cực nhỏ dính vào kháng thể để tìm kiếm tế bào ung thư.

Tiêu diệt tế bào ung thư bằng “bom” nano

Dùng các ống nano để tạo ra "bom" nano. Các quả "bom" này được bao bọc xung quanh bởi các ống nano carbon và chúng có thể phát nổ.

Kỹ thuật lai huỳnh quang tại chỗ (FISH)

FISH (Fluorescent insitu hybridization) là kỹ thuật trung gian giữa di truyền tế bào và di truyền phân tử, sử dụng một đoạn mồi đặc hiệu (probe) gắn tín hiệu huỳnh quang, để phát hiện sự có mặt hoặc vắng mặt của một đoạn gen nào đó trên nhiễm sắc thể, với ưu điểm nhanh, đặc hiệu và chính xác. FISH đặc biệt có hiệu quả trong việc phát hiện những mất đoạn gen nhỏ (microdeletion), hoặc để khẳng định nguồn gốc của các loại chuyển đoạn đặc biệt.
          Ngoài ra interphase FISH (FISH nhanh) còn được sử dụng rộng rãi trong chẩn đoán trước sinh, để phát hiện những bất thường số lượng của một số nhiễm sắc thể thường gặp (13,18,21,X,Y)

Bệnh Thiếu máu huyết tán Alpha - Thalassemia

Alpha thalassemia là một trong các bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể thường phổ biến nhất thế giới. Bệnh do đột biến gen HbA, nằm trên cánh ngắn nhiễm sắc thể 16 (16p13.3) gây ra sự giảm hoặc mất tổng hợp chuỗi alpha globin. Hemoglobin ở người trưởng thành bình thường có 2 chuỗi alpha globin và 2 chuỗi beta globin. Chuỗi alpha globin được tổng hợp từ 4 gen, trong đó có 2 gen HbA1 và 2 gen HbA2. Số lượng của alpha globin phụ thuộc vào số gene hoạt động. Người càng có ít gene hoạt động thì càng mắc thể bệnh alpha thalassemia nặng hơn.

Bệnh Thiếu máu huyết tán Beta - Thalassemia

Beta thalassemia là bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể thường do đột biến gen β-globin nằm trên cánh ngắn NST 11 qui định (11p15.5), gây giảm hoặc mất tổng hợp chuỗi β globin. Beta thalassemia là một trong những bệnh huyết sắc tố phổ biến nhất, phân bố khắp thế giới.
Ở Việt Nam, theo Nguyễn Công Khanh, bệnh β thalassemia là nguyên nhân hàng đầu gây thiếu máu, tan máu nặng ở trẻ em. Tỷ lệ người mang gen bệnh phân bố trong cả nước và khác nhau tùy từng địa phương, từng nhóm dân tộc. Đặc biệt, tỷ lệ mang gen bệnh rất cao ở các dân tộc ít người như: Mông (25%), Catu (14%), Tày (11%), Pako (8.33%).